毒理學試驗中(zhōng)對參考物(wù)質的選擇是替代測試方法的發展、優化和驗證的關鍵步驟。EURL ECVAM JRC聯合實驗室根據現有更新的資(zī)料，修訂了體(tǐ)外(wài)遺傳毒性測試方法中(zhōng)遺傳毒性和非遺傳毒性的參考物(wù)質清單。自2008年開(kāi)始，毒理學家們對參考物(wù)質清單達成共識并用于多種用途，包括現有試驗程序的優化，全自動高通量測試的實施以及方法驗證。此外(wài)，參考物(wù)質清單減少了一(yī)些體(tǐ)外(wài)方法的假陽性結果。

    新修訂的清單包括69種不同結構和作用方式的化學物(wù)，分(fēn)爲體(tǐ)外(wài)試驗陽性和陰性分(fēn)類，有助于開(kāi)發和接受新的和改良的體(tǐ)外(wài)遺傳毒性方法，從而提高體(tǐ)外(wài)遺傳毒性方法預測能力，改善操作程序。推薦清單主要适用于以下(xià)三類：
    第一(yī)類：該物(wù)質在體(tǐ)外(wài)哺乳動物(wù)細胞遺傳毒性試驗結果爲陽性；該類物(wù)質是體(tǐ)内遺傳毒性物(wù)質，通過DNA反應性或非DNA反應性（如引起非整倍體(tǐ)或引起拓樸異構酶抑制）。大(dà)多數是已知(zhī)緻突變的緻癌物(wù)，而一(yī)部分(fēn)物(wù)質是引起非整倍體(tǐ)化合物(wù)，其緻癌機制尚不清楚。
    第二類：該類化學物(wù)在體(tǐ)外(wài)哺乳動物(wù)細胞遺傳毒性試驗結果爲陰性，且現有體(tǐ)外(wài)哺乳動物(wù)細胞遺傳毒性試驗爲陰性；該類物(wù)質通常體(tǐ)内遺傳毒性試驗陰性和非DNA反應性。通常是非緻癌物(wù)或通過可接受的非緻突變方式的齧齒類動物(wù)緻癌物(wù)。
    第三類：體(tǐ)外(wài)哺乳動物(wù)遺傳毒性試驗陰性，但在高劑量或細胞毒性條件下(xià)，引起染色體(tǐ)畸變或小(xiǎo)鼠淋巴瘤細胞TK基因突變。該類物(wù)質通常體(tǐ)内遺傳毒性結果陰性，Ames結果陰性，通常是非緻癌物(wù)或通過可接受的非緻突變方式的齧齒類動物(wù)緻癌物(wù)。
 

表1  體(tǐ)内遺傳毒性且體(tǐ)外(wài)哺乳動物(wù)細胞遺傳毒性試驗陽性參考物(wù)質

表2  非DNA反應性化學物(wù)（包括非遺傳緻癌物(wù)）且體(tǐ)外(wài)哺乳動物(wù)細胞遺傳毒性試驗陰性參考物(wù)質

表3  非DNA反應性化學物(wù)（包括非遺傳緻癌物(wù)）、代謝毒物(wù)和其他體(tǐ)外(wài)哺乳動物(wù)細胞遺傳毒性試驗陰性，

但通常在高劑量或高細胞毒性情況陽性參考物(wù)質